測(cè)定微生物自含硫氨基酸（sulfur-containing amino acid）或無(wú)機(jī)硫化物（inorganic sulfur compounds）等受質(zhì)中產(chǎn)生硫化氫（hydrogen sulfide）的能力。

微生物產(chǎn)生硫化氫之發(fā)酵途徑，主要有兩種。

途徑一：

硫化氫由培養(yǎng)基中蛋白質(zhì)成份之半胱氨酸（cysteine）還原而產(chǎn)生。 蛋白質(zhì)經(jīng)微生物酵素分解，形成含硫之半胱氨酸，此氨基酸經(jīng)半胱氨酸脫硫酵素（cysteine desulfurase）作用失去硫原子，而自水分子加入氫形成硫化氫。

途徑二：

硫化氫由無(wú)機(jī)硫化合物如硫代硫酸鹽（thiosulfate；S2O32-）、硫酸鹽（sulfate；SO42-）或亞硫酸鹽（sulfite；SO32-）等所產(chǎn)生，當(dāng)培養(yǎng)基含硫代硫酸鈉時(shí)，有些微生物可將其還原為亞硫酸鹽，并釋出硫化氫。

本實(shí)驗(yàn)使用SIM培養(yǎng)基，內(nèi)含蛋白質(zhì)與硫代硫酸鈉作為硫受質(zhì)，另含硫酸銨亞鐵（ferrous ammonium sulfate；Fe(NH4)2SO4）作為硫化氫指示劑，（硫化氫為無(wú)色氣體，不易察覺(jué)，硫酸銨亞鐵之亞鐵離子可與硫化氫反應(yīng)生成不溶性硫化亞鐵之黑色沉淀。）培養(yǎng)基含0.3﹪瓊脂使成半固體，以增強(qiáng)厭氧呼吸，亦可觀察微生物之運(yùn)動(dòng)性，如具運(yùn)動(dòng)性，則微生物生長(zhǎng)沿接種線向四周擴(kuò)散，使培養(yǎng)基呈混濁，如無(wú)運(yùn)動(dòng)力，則生長(zhǎng)于接種線。